A – OBJETIVO

Estabelecer
o procedimento para usar softwares integradores para fornecer
resultados de boa qualidade.

B
– ALCANCE

• Departamento
  de Controle da Qualidade: Laboratório físico-químico.

C
– Abrangência

• Analistas,
  Técnicos de Laboratório de Controle da Qualidade

D – DEFINIÇÕES

1.
Cromatograma:
É
uma representação gráfica da resposta do detector e representa a
concentração do analíto através do tempo.

2.
Tempo de Retenção (TR): É
o tempo necessário de eluição de um analíto desde sua injeção
no equipamento, passando pela coluna até atingir seu ponto mais alto
de detecção.

3.
Tempo Morto (T0): O
É
definido como tempo morto, partindo de zero até o tempo que uma
substância injetada e que não tenha nenhuma interação com a
coluna. Pode ser interpretado também como o sinal referente ao
volume morto, ou seja, também conhecido como atraso de volume, que é
o volume de eluente necessário para passar por toda a tubulação e
coluna até chegar ao detector.

4.
Tempo de Retenção Relativo (TRR ou RRT): É
definido como a razão entre os tempos de retenção, onde o pico
principal é o divisor.

5.
Pratos Teóricos: É
definido como um parâmetro de desempenho de uma coluna. Os pratos
teóricos medem a eficiência da coluna: quanto maior o número de
pratos teóricos, maior o número de interações com a coluna.

6.
Resolução: A
resolução entre picos é medida para garantir que o sistema tenha o
poder de resolução para separar os componentes durante a eluição
de uma mistura.

É
definido como parâmetro que mede a separação entre dois picos.

7.
Fator de Cauda (Simetria): O
fator de cauda, também conhecido como fator de simetria, ele
estabelece a máxima assimetria admissível do pico. Para um pico
simétrico, o fator de cauda, é de 1,0.

8.
Razão Pico/Vale: A
razão p/v pode ser utilizada como critério de adequação do
sistema em testes de substâncias relacionadas quando a separação
de linha de base entre dois picos não é obtida. Onde a altura acima
da linha de base extrapolada do menor pico é dividida pela a altura
acima da linha de base extrapolada ao ponto mais baixo da curva que
separa o menor e o maior pico.

9.
Sinal/Ruído: A
relação sinal/ruído (S/N) é um parâmetro útil de adequação do
sistema. Onde o ruído é a diferença entre os maiores e os menores
valores de ruído levando em conta a flutuação do sinal.

10.
Fator de Capacidade (K): É
definido como a relação entre a quantidade de soluto na fase
estacionária e a quantidade de soluto na fase móvel.

11.
Precisão: A
precisão é uma medida de quão próximo o resultado experimental
estão do “valor verdadeiro”.

12.
Exatidão: A
exatidão diz respeito à determinação de um valor exato e o mais
próximo possível do valor concreto.

13.
Linha de Base:
É o sinal produzido pelo detector quando nenhum pico está sendo
detectado. Exemplo: quando somente está sendo eluindo certo solvente
durante certo tempo, a linha de base deve se assemelhar a uma reta.

Início
e Fim do Pico –

14.
Área: É
a região acima da linha de base construída.

15.
Largura do pico (Peak width):
É o valor da largura do pico em segundos, medido do ponto inicial do
pico até o ponto final do pico.

16.
Limiar do pico (Threshold):
O limiar de decolagem ou aterrissagem define a inclinação mínima
do sinal em μV/s da qual é detectado um pico. O software examina os
pontos individuais e mede a inclinação do sinal em intervalos de
pontos e depois determina onde inicia ou termina um pico.

17.
Ponto de Vale: Geralmente
uma diminuição e um aumento de sinal no início do cromatograma.
Causado principalmente pela depressão da injeção, solvente da
injeção e picos não retidos.

18.
Pontos de Inflexão: São
os pontos onde há uma brusca mudança de direção na resposta do
detector mostrado no cromatograma. É comum ocorrer no cume do pico e
entre dois picos mal resolvidos.

19.
Picos Resolvidos:
É o ponto onde o detector se desvia da linha de base e onde retorna
a linha de base, respectivamente.

20.
Picos Mal Resolvidos: São
picos onde não há uma clara separação entre os picos, ou há uma
coeluição parcial ou total com picos próximos. Também podem se
apresentar como picos onde não houve um retorno da linha de base,
tal como no início do pico.

21.
Eluição:
– O processo de movimentação de compostos da cromatografia.

22.
Coeluição:
– A eluição simultânea de dois ou mais compostos para o detector
em o mesmo tempo.

23.
Picos negativos:
Picos negativos em cromatogramas são perturbações repentinas no
sinal cromatográfico abaixo da linha de base normal.

24.
Carry-over: É
resultado da contaminação do sistema e resulta em um sinal não
relacionado à análise atual.

25.
Suavização de pico (Smoothing): A
suavização de pico aplica um algoritmo para dar uma aparência de
pico mais agradável e mais fácil de integrar.

25.1
Smoothing
Médio:
O algoritmo de média é um algoritmo simples e básico, usa técnica
de filtragem onde a média de um conjunto de entrada é usada para
gerar um valor de saída. Este algoritmo tem uma tendência a reduzir
a amplitude do sinal porque os ápices de pico são calculados para
baixo com os valores mais baixos que cercam eles. A média móvel é
um algoritmo primitivo, mas pode ser útil nos casos em que os picos
são relativamente amplos (mais de 30 segundos).

25.2
Smoothing
Savitzky-Golay:
O algoritmo Savitzky-Golay foi originalmente desenvolvido para
espectroscopia, mas funciona bem para outros conjuntos de dados. Este
algoritmo calcula a média dos pontos em um conjunto de dados, mas
primeiro multiplica cada ponto por um fator de ponderação. Os
fatores, que são derivados de polinômios de segundo e terceiro
graus, dão a maior ênfase ao ponto central do conjunto de dados, e
progressivamente menos ênfase aos pontos mais longe. A distorção
dos ápices dos picos é minimizada com este algoritmo.

E
– PROCEDIMENTOS

1. Processamento
   dos resultados

1. 1. Abrir
      a pasta dos resultados e selecionar as injeções de interesse.

   2. Verificar
      se todas as informações das injeções estão corretas.

   3. Salvar
      e iniciar o processamento.

   4. Criar
      um método de processo.

   5. Selecionar
      os parâmetros de integração adequados
      para correta determinação.

   6. Quando
      aplicável criar método de calibração.

   7. Salvar
      os resultados.

   8. Imprimir
      com o relatório apropriado.

2. Técnicas
   de Integração

1. As
   técnicas
   de integração são aplicáveis no uso de programas de computador
   que manuseiam os dados cromatográficos. O uso das funções desses
   programas deve ser adequado para correta determinação e
   quantização.

2. O
   sistema integrador do programa deve conter a linha de base, as
   marcas do início e fim de cada pico e a identificação de cada
   pico.

Figura
1: Representação de cromatograma

3. Nenhum
   tipo de técnica de integração pode melhorar cromatogramas
   provenientes de baixa qualidade cromatográfica.

4. O
   uso de técnicas de integração automático é preferível, pois o
   programa aplica as funções configuradas pelo usuário nos
   processamentos, sendo assim, a mesma regra é aplicada em todos os
   cromatogramas dentro de um mesmo processamento.

5. Já
   a integração manual é uma técnica a ser evitada, e o motivo de
   sua utilização deve ser claramente explicado.

NOTA:
Devido
à complexidade de diversos tipos de cromatogramas, o uso das
técnicas de integração deve ser avaliado antes da utilização.

6. O
   programa deve permitir posteriores integrações, principalmente em
   casos de impurezas e cromatogramas complexos.

7. O
   programa deve calcular automaticamente os parâmetros de
   adequabilidade do sistema como Desempenho de Separação,
   Assimetria, Resolução entre outros.

8. A
   frequência de aquisição de dados do detector precisa ser adequada
   para o tipo de cromatograma desejado.

9. O
   programa integrador deve indicar o início do pico, o fim e pontos
   de vale do cromatograma corretamente.

Figura
2: Exemplificação sobre reconhecimento de picos

10. Os
    pontos de vale não podem interferir na correta separação de picos
    parcialmente resolvidos.

11. A
    localização correta da linha de base é essencial para uma correta
    interpretação da acurácia do pico, sendo assim a linha de base de
    uma amostra deve se assemelhar ao máximo com a linha de base de um
    branco em corridas semelhantes. Uma vez que os picos estão
    resolvidos e identificados dentro do cromatograma, o algoritmo de
    integração do programa desenha uma linha de base desde o início,
    até o final de cada pico ou de grupo de picos.

12. Um
    pico pode ter quatro tipos principais de construção: Linha de Base
    a Linha de Base (BB);
    Linha de Base a Vale (BV);
    Vale a Linha de Base (VB);
    Vale a Vale (VV).

Nota:
A capitalização do rótulo indica o seguinte:

• Letras
  maiúsculas – A integração foi realizada automaticamente pelo
  software.

• Letras
  minúsculas – A integração foi realizada manualmente.

Por
exemplo, um rótulo de linha de base de Bb indica que enquanto o
início e o fim do pico são ambos resolvidos na linha de base, o
início do pico foi integrado automaticamente pelo software e a
extremidade do pico foi ajustada manualmente.

13. Os
    parâmetros de integração devem ser capazes de identificar
    corretamente estas construções da linha de base.

14. Onde
    ocorrer mudanças na linha de base que se verifique através de
    branco, motivadas principalmente por mudanças de gradiente de
    eluentes ou temperatura, por exemplo, a linha de base deve ser
    construída de forma a minimizar os erros de integração dos picos
    de interesse.

15. Durante
    a eluição em gradiente, a composição do eluente irá mudar e,
    assim, a sua resposta no detector. Isso normalmente se manifesta
    como um aumento gradual na resposta durante o gradiente em função
    do tempo. Para compensar a alteração nas propriedades, um
    comprimento de onda de referência pode ser definido.

16. Desvios
    negativos na linha de base podem ocasionar erros na interpretação
    do início de um pico ou no final. Estes erros de interpretação
    podem ser minimizados por inibição de picos negativos ou outra
    ferramenta que evite o problema.

Figura
3: Exemplificação sobre desvio na linha de base

17. A
    subtração da linha de base deve ser usada somente quando for
    demonstrado que a linha de base é reprodutível, e ainda usada com
    atenção.

18. A
    linha de base é considerada aceitável se o sinal do ruído permite
    integrações consistentes e precisas. Isso pode ser verificado
    através do branco, quando ele demostrar nenhuma anomalia que possa
    ser significante para resultar em integrações e interpretações
    errôneas.

19. O
    inicio e o fim dos picos resolvidos é o ponto onde o detector se
    desvia da linha de base e onde retorna a linha de base,
    respectivamente.

3. 16. O
       algoritmo do software deverá calcular a área total do pico
       adicionando as áreas para cada intervalo de ponto de dados entre o
       início do pico e o fim do pico.

3. 16. A
       Largura do pico (Peak width) determina um fator de agrupamento
       durante a detecção de pico. O valor da largura de pico pode
       aumentar a sensibilidade e permitir que picos relativamente
       pequenos sejam devidamente integrados, entretanto, em picos
       maiores, podem não ser detectados adequadamente. O valor da
       largura deve ser ajustado para se obter picos devidamente
       integrados.

3. 16. O
       Limiar do pico (Threshold) define a inclinação mínima do sinal
       da qual é detectado um pico. O valor de threshold é uma medida de
       declive que o software usa para determinar os pontos iniciais e
       finais durante a detecção de pico. Um valor de threshold
       relativamente baixo aumenta a sensibilidade e pode permitir que
       picos relativamente pequenos sejam devidamente integrados. Se
       muitos picos de ruído estiverem sendo integrados na linha de base,
       aumentar o valor de threshold pode impedir que esses pequenos picos
       sejam integrados.

19. O
    critério de Área Mínima determina a área mínima necessária
    para que um pico integrado seja incluído na lista de picos. Se a
    área do pico integrado ficar abaixo do valor definido, o pico é
    removido da lista de picos. Se a área for igual ou maior que o
    valor ajustado, o pico será integrado.

19. O
    critério Altura Mínima determina a altura mínima necessária para
    que um pico integrado seja incluído na lista de picos. Se a altura
    do pico integrado ficar abaixo do valor ajustado, o pico é removido
    da lista de picos. Se o valor absoluto da altura for maior ou igual
    ao valor definido, o pico é integrado.

Nota:
A área mínima e a altura mínima são úteis para remover pequenos
picos integrados. Definir um valor elevado para esses parâmetros
pode fazer com que os picos integrados sejam rejeitados como ruído.
Inversamente, um valor baixo pode fazer com que os ruídos de linha
de base sejam integrados como picos.

19. O
    evento de Inibição de Integração inibe a detecção de qualquer
    pico em um determinado intervalo de tempo, seja ele positivo ou
    negativo. Se este evento se sobrepõe a um pico, ele pode afetar a
    detecção do pico sobreposto. Este evento requer um tempo de início
    e um tempo de fim. O evento não tem um valor. Esse evento pode
    sobrepor todos os outros eventos.

19. A
    relação pico/vale pode ser empregada como um critério de
    adequabilidade quando não se busca a separação entre dois picos
    na linha de base. A razão se dá pela a altura do pico menor acima
    da linha de base com a altura no ponto mais baixo da curva, que
    separa os picos menores e maiores, acima da linha de base.

19. A
    separação
    de Picos Mal Resolvidos ou picos que não são completamente
    separados podem ser extrapolados de três maneiras: por retas
    perpendiculares a linha de base, extrapolação tangencial ou
    exponenciais, por vale e vale.

Figura
4: Exemplificação sobre separação de picos

Nota:
Deve-se notar que o uso de tangentes irá subestimar a área do pico
maior e na maioria dos casos, a exponencial irá superestimar a área
do pico menor. Sendo assim o uso de extrapolação exponencial é uma
técnica recomendada para estimar a área do pico maior e o uso de
extrapolação tangencial é uma técnica recomendada para estimar a
área do pico menor.

3. 26. De
       qualquer forma, a menos que especificado diferentemente na
       monografia, para picos que não estejam completamente separadas, de
       preferência, devem sem extrapoladas tangencialmente por vale a
       vale da linha de base de vale a vale.

3. 26. Forcar
       pico (Force
       Peak)
       controla
       a integração de pico com base na janela de tempo de início e
       término especificado. Quando habilitada o software trata a janela
       de tempo como o novos pontos de início e fim de pico e desenha a
       nova linha de base entre os dois pontos. O uso de Force
       Peak
       deve ser evitado, pois esse evento sempre força um pico mesmo
       quando não haveria um pico a ser integrado no intervalo definido,
       isso inclui forçar um pico durante um evento de Inibição de
       Integração. Quaisquer picos que se sobrepõem ao pico criado pelo
       evento Force
       Peak
       serão excluídos.

19. O
    ruído da linha de base (Noise)
    dificulta a medição das áreas de pico e, portanto, reduz a
    confiança nos resultados da análise. De preferência rejeitar
    cromatogramas com o ruído de linha de base muito intenso.

19. Para
    determinar o Ruído de Linha de Base (Noise), deve se selecionar um
    intervalo de tempo mais próximos do pico de interesse onde a linha
    de base for mais estável. A amplitude desse intervalo deve ser de 2
    a 4 vezes a largura do pico de interesse mais estreito medido à
    meia-altura. O ruído é calculado pela absorbância mínima e
    máxima na região especificada, então, o intervalo de ruído
    selecionado não pode conter nenhum pico que tenha absorbância e
    flutuações na linha de base. Para ensaios com gradiente,
    preferencialmente definir um intervalo em uma parte isocrática.

19. A
    relação sinal-ruído (S/N) é a razão entre a altura de um pico
    sinal medido e o ruído. O S/N estabelece um limite para a menor
    quantidade de soluto que pode ser detectada como um único pico. A
    menos que especificado diferentemente na monografia, é recomendado
    um S/N maior ou igual a 10.

19. Usar
    o parâmetro USP
    S/N
    para calcular o valor de Sinal-Ruído, pois alguns Softwares podem
    trazer como padrão o parâmetro s/n,
    que tem a fórmula de cálculo divergente aos critérios
    farmacopeicos.

Nota:
O USP
S/N
é calculado como: S/N = 2 x (Altura – (0,5 x Ruído / Escala)) /
(Ruído / Escala).

19. O
    uso de Smoothing deve ser evitado, porem se feito corretamente, os
    picos deveram refletir com precisão a área do pico verdadeiro
    quando integrados adequadamente. A suavização excessiva pode
    comprometer o sinal, portanto, é preciso ter cuidado e seu uso
    deverá ser justificado.

Nota:
É recomendo, quando necessário, o uso do algoritmo Savitsky-Golay
em vez da Média,
porque isso não afetará a forma do pico, a menos que exagere
seriamente. Basicamente o algoritmo Savitsky-Golay
ajusta uma curva polinomial através de uma sucessão de pontos, e
escolhe o ponto no meio da curva como o ponto de melhor ajuste. Isso
significa que ele pode se curvar em torno dos inícios e finais
curvilíneos dos picos, onde a Média
manchará o pico e o tornará mais largo. Além disso, é realmente
muito difícil recomendar parâmetros ideais, porque a suavização
realmente interage com o integrador.

3. Critérios
   de Integração

1. 1. Todas
      as injeções deveram ser processadas, conforme os critérios de
      requeridos pela metodologia.

1. 2. Para
      avaliação dos critérios cromatográficos deve-se consultar o
      Método
      Geral MG-FQ-0051.
      Preferencialmente usar os parâmetros da Farmacopéia Americana
      (USP).

1. 3. É
      importante a escolha de uma definição de Limiar (threshold) e
      Largura do pico (Peak Width) apropriados para a integração das
      áreas dos picos.

1. 4. Critérios
      de Rejeição de picos (Mínima Área, Mínima Altura e Inibição
      de Integração) devem ser aplicados de forma apropriada.

1. 5. No
      processamento dos dados identificar os picos principais.

   6. Nos
      cromatogramas da solução padrão devem ser integrados somente os
      picos de interesse e preferencialmente acima do LQ.

1. 7. Nos
      cromatogramas
      da
      solução amostra deveram ser processados descartando picos dentro
      do V0, abaixo do LQ e provenientes do placebo e/ou diluente.

1. 8. Preferencialmente
      utilizar a solução padrão para avaliar os critério de
      adequabilidade do sistema e os parâmetros cromatográficos, como,
      pratos teóricos, fator cauda e desvio padrão relativo para
      replicatas das injeções.

1. 9. Preferencialmente
      processar a Solução Padrão e a Solução Amostra com os mesmos
      critérios de integração.

1. 10. Pode
       ser necessario processar de forma isolada as Soluções de
       Adquabilidade do Sistema, nesse caso usar os mesmos critérios e
       parâmetros entre as mesmas injeções do início ao fim da
       análise.

1. 11. Para
       o ensaio de Impurezas pode ser necessario processar de forma
       isoladas a Solução Amostra, nesse caso usar os mesmos critérios
       e parâmetros de integração para as replicatas da Amostra.

1. 12. Para
       o ensaio de Impurezas quando é utilizado amostra muito concentrada
       onde o pico principal saia do intervalo de linearidade, resultando
       em picos distorcidos, os critérios cromatograficos para Fator de
       cauda, Pratos Teóricos e Perfil do pico não seram aplicados e
       poderam ser adotados parâmetros de integração de forma isolada e
       adequada para cada pico distorcido entre as replicatas da Amostra.

1. 13. Não
       fazer uso de integração manual.

1. 14. No
       processamento dos dados da fase móvel, diluente e/ou placebo,
       identificar os picos preferencialmente
       acima do LQ com
       sequencia numérica crescente ao TR. (Ex: Pico Diluente 01, Pico
       Diluente 02… Pico Placebo 01, Pico Placebo 02…).

1. 15. Picos
       abaixo do LQ quando integrados não precisam ser nomeados.

1. 16. Todos
       os picos não desconsiderados no cromatograma devem ter sua área
       quantificada.

1. 17. No
       processamento dos dados da amostra os picos das impurezas
       desconhecidas devem ser identificadas pelo seu tempo de retenção
       relativo em relação ao tempo de retenção do pico principal.
       (Ex: Imp. Desc. TRR 0,154, Imp. Desc. RRT 0,549…).

1. 18. Idealmente,
       os picos de placebo devem estar presentes no cromatograma da
       amostra e devem ser semelhantes.

Nota:
Um placebo deverá ter todos os excipientes usados na fabricação do
produto assim como deve passar pelas mesmas etapas de fabricação,
mesmo que feito em escala de laboratório, e sua preparação deve
receber o mesmo tratamento que a amostras para não ocorrer
alterações durante o teste quanto ao número de picos e suas aréas.

1. 19. Se
       os resultados indicarem que o pico de placebo presente na amostra é
       maior que 20% de sua área na solução placebo, deve-se então
       considerá-lo como pico de impureza e quantificá-lo. Para
       descartar picos com variação maior que 20%, deve ser apresentada
       justificativa técnica.

1. 20. Não
       é aplicavel estimar um pico de impureza subtraindo a área do pico
       do placebo com o mesmo TR.

1. 21. Não
       deve ser detectada interferência, mas caso
       detecte algum pico na solução placebo que elua no mesmo tempo de
       retenção do ativo avaliar a interferência deste pico em relação
       à solução padrão. A interferência permitida será de no máximo
       5,0%.

1. 22. A
       pureza de pico quando aplicável deverá ser avaliada com o valor
       de Purity Angle (PA) menor que o de Purity Threshold (PH), com a
       linha do gráfico de Purity abaixo e em nenhum momento cruzando com
       a linha de Auto Threshold.

1. 23. No
       gráfico de pureza de pico apresentar o M (maior diferença
       espectral) diferenciando as linhas para melhor avaliação,
       apresentando distinção entre si. Exemplo: linha contínua e
       pontilhada.

1. 24. Ao
       final, sobrepor os cromatogramas nos diferentes tempos e observar o
       aparecimento de picos secundários e alterações no perfil
       cromatográfico.

1. 25. Criar
       um report e imprimir os resultados.

4. Critérios
   de Quantificação

3. 1. Durante
      a quantificação, devem ser ignorados os picos causados por
      solventes e reagentes provenientes da fase móvel ou da matriz de
      amostra.

3. 2. Normalização:
      O teor percentual de um componente do material de ensaio é
      calculado determinando a área do pico correspondente como uma
      percentagem da área total de todos os picos, excluindo aqueles
      devidos a solventes ou reagentes ou provenientes da fase móvel ou
      da matriz de amostra e aqueles abaixo do limite em que podem ser
      desconsiderados;

3. 3. Procedimento
      de Calibração: É determinada a relação entre o sinal (a
      resposta obtida pelo detector) medido no eixo y e a quantidade de
      substância (por exemplo, concentração ou massa) no eixo x e
      calculada uma função. Os resultados analíticos são calculados a
      partir do sinal medido no eixo y, extrapolando sua posição na
      curva de calibração no eixo x. A curva de calibração representa
      a relação entre a resposta do instrumento e a concentração de
      analito conhecida.

4.3.1 Padrão
Externo: A concentração de cada componente quantificado é
determinada comparando a resposta da solução padrão com a resposta
obtida com a solução amostra;

4.3.2 Padrão
Externo + Interno: Quantidades iguais do padrão interno são
introduzidas na solução amostra e solução padrão. As razões
entre a área da solução padrão com a área do padrão interno são
utilizadas para determinar os analítos comparando com a razão da
área da solução amostra com a área do padrão interno.

3. 4. Procedimento
      Recuperação: É a eficiência de extração de um método
      analítico, expressa em percentagem na quantidade de um analito,
      obtida a partir da comparação dos resultados analíticos através
      de curva de calibração.

3. 5. Preferencialmente
      o
      intervalo da linearidade deve abranger: para
      teor, de 80% (oitenta por cento) a 120% (cento e vinte por cento);
      para uniformidade de conteúdo, de 70% (setenta por cento) a 130%
      (centro e trinta por cento); para teste de dissolução, de -20%
      (menos vinte por cento) da menor concentração esperada a +20%
      (mais vinte por cento) da maior concentração esperada a partir do
      perfil de dissolução; para determinação de impurezas, do limite
      de quantificação até 120% (cento e vinte por cento) da
      concentração no limite da especificação de cada impureza
      individual; para determinação simultânea de teor e impurezas, do
      limite de quantificação (LQ) até 120% (cento e vinte por cento)
      da concentração esperada da substância ativa.

   6. Quando
      impurezas precisam ser determinadas com maior certeza, pode ser
      usado um padrão da própria impureza ou aplicado um fator de
      correção com base na resposta da impureza em relação à da
      componente principal.

3. 7. Quando
      o ensaio de impurezas não contiver o limite abaixo do qual um pico
      é desprezado, integrar a área de todos os picos.

5. Critérios
   de Notificação

2. 1. Todos
      os cromatogramas deverão apresentar os parâmetros do instrumento
      e o caminho onde os dados foram adquiridos.

2. 2. Todos
      os cromatogramas deverão apresentar pelo menos o nome da injeção,
      o tempo de rentenção, área, pratos teóricos e fator cauda.
      Observar no método a exigência de outro parâmetro e o mesmo deve
      ser incluído no cromatograma.

2. 3. A
      escala dos cromatogramas deverá ser ajustada para 100% do pico
      princial nas soluções padrão e para as demais soluções de
      adequabilidade poderá ser ajustada de forma que visualize o
      critério de adequabilidade estabelecidos na metodologia.

   4. A
      escala dos cromatogramas da amostra deverá ser ajustada
      preferencialmente para que sejam visualizados todos os picos de
      interesse de forma clara.

   5. Os
      critérios de adequabilidade do sistema podem variar de acordo com
      a metodologia a ser validada. Caso presente nos reports os
      parâmetros abaixo, preferencialmente deverão seguir o número de
      casas decimais:

Parâmetro	N° casas decimais
Tempo de retenção	2
Tempo de retenção relativo	3
Área	0
Concentração	5
Fator Mutiplicativo	5
Fator Divisor	5
Fator Cauda	1
Pratos Teóricos	0
Sinal/Ruído	0
Resolução	1
Fator de capacidade	1
Média	De acordo com o parâmetro da metodologia
Desvio padrão	2
Desvio padrão relativo	2
Resultado	De acordo com o parâmetro da metodologia

6. Regras
   de Arredondamento

6.1
A regra de arredondamento de casas decimais dos resultados
obtidos nas análises a serem relatados segue conforme CQG.018 –
REGRAS PARA REPORTE DE RESULTADOS DE DADOS ANALÍTICOS.

6.2
O arredondamento somente deve ser aplicado ao resultado final
relatado sendo que todos os resultados finais obtidos nas análises
devem ser reportados com a mesma quantidade de casas decimais da
metodologia analítica.

6.3
Para métodos de Impurezas em primeiro lugar arredondar para o
numero de casas do menor limite do método, em seguida avaliar se os
dados serão desconsiderados e depois fazer a média e a soma dos
resultados.

Nota:
Picos abaixo do limite de desconsideração não devem ser somados ao
total.

6.4
O arredondamento feito pelo software deve obedecer às regras
acima citadas.

6.5
Quando não for detectado pico de impureza em apenas uma das
amostras reportar somente a impureza detectado sem fazer média.